Terreni di coltura selettivi fondamentali, solidi e liquidi

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Simon Doyle

Il terreni di coltura selettivi sono quegli agar e brodi che servono per l'isolamento di un gruppo definito di microrganismi, inibendo lo sviluppo di altri. Sono ideali per la semina di campioni polimicrobici, consentendo il recupero del patogeno desiderato tra il microbiota di accompagnamento.

Esiste una grande varietà di mezzi selettivi, tra solidi e liquidi. Alcuni sono destinati all'isolamento di batteri Gram positivi, come Staphylococcus coagulasi positivo, Lactobacillus, Bifidobacteria, ecc..

Terreni di coltura selettivi. Fonte: Air1404 [CC BY 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0)]

Altri per il recupero di patogeni Gram negativi, come le specie dei generi Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, tra gli altri..

Così come ci sono anche per favorire la crescita di funghi e lieviti, come specie Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofiti, tra gli altri..

Va notato che alcuni terreni arricchiti non selettivi possono diventare selettivi con l'aggiunta di antibiotici. Allo stesso modo, alcuni terreni di coltura possono essere selettivi e differenziali allo stesso tempo..

D'altra parte, ci sono terreni di coltura liquidi selettivi; alcuni possono fungere da terreno di arricchimento, favorendo l'esacerbazione di un gruppo selettivo di batteri, sopprimendo quello di altri.

I terreni di coltura selettivi sono ampiamente utilizzati nei laboratori di microbiologia per l'analisi di vari tipi di campione; nonché per l'isolamento di una grande varietà di microrganismi di interesse clinico, industriale, ambientale e alimentare.

Indice articolo

  • 1 Razionale
  • 2 Terreni di coltura solidi selettivi
    • 2.1 Agar Baird-Parker
    • 2.2 BCYE Agar o Charcoal Yeast Extract Buffer Agar
    • 2.3 Agar BHI con antibiotici
    • 2.4 BIGGY agar o Nickerson agar
    • 2.5 Bordet Gengou Agar
    • 2.6 Campy agar con sangue
    • 2.7 Campylobacter Butzler Agar
    • 2.8 Campylobacter Skirrow Agar
    • 2.9 Agar CCF o agar fruttosio, cicloserina, cefoxitina
    • 2.10 Agar cetrimide
    • 2.11 Agar cioccolato con isovitalex e vancomicina
    • 2.12 Agar CIN o agar cefsulodina, irgasan, novobiocina
    • 2.13 Agar CNA (colistina, acido nalidixico)
    • 2.14 Agar Czapek 
    • 2.15 Agar EMB
    • 2.16 Endo Agar
    • 2.17 Hektoen Agar
    • 2.18 Agar Löwenstein-Jensen
    • 2.19 Mac Conkey Agar
    • 2.20 Agar salato al mannitolo
    • 2.21 SS agar
    • 2.22 Regan Lowe Agar
    • 2.23 Agar SABHI
    • 2.24 Bacitracin Horse Blood Agar
    • 2.25 Agar carbone sangue di cavallo
    • 2.26 Agar sangue kanamicina-vancomicina (KV)
    • 2.27 Bismuth Sulfite Agar
    • 2.28 TCBS agar (tiosolfato, citrato, sali biliari)
    • 2.29 Agar Thayer-Martin
    • 2.30 Agar verde brillante
    • 2.31 Agar Vogel-Johnson
    • 2.32 XLD agar
    • 2.33 CHROMagar (Candida Medium)
    • 2.34 Middle Ellinghausen McCulough Johnson e Harris (EMJH)
  • 3 Terreni di coltura liquidi selettivi
    • 3.1 Brodo BHI NaCL 6,5%
    • 3.2 Brodo CE
    • 3.3 Brodo GN
    • 3.4 Brodo Rappaport-Vassiliadis
    • 3.5 Brodo di selenite
    • 3.6 Brodo tetrationato
    • 3.7 Campy Thioglycollate Broth
    • 3.8 Brodo Todd-Hewitt con sangue e antibiotici
  • 4 Riferimenti

Base

I terreni di coltura selettivi si basano sul contenere sostanze nutritive che favoriscono la crescita di uno specifico batterio o fungo o di un certo gruppo di questi, e allo stesso tempo devono contenere sostanze inibitorie che non permettano lo sviluppo di altri microrganismi indesiderabili..

Tra le sostanze nutritive che possono contenere ci sono: digestato pancreatico di caseina, estratto di lievito, polipeptoni, tra gli altri.

Gli inibitori includono: antibiotici, sali biliari, verde brillante, violetto cristallino, fucsina basica, eosina, blu di metilene, desossicolato di sodio, solfito di sodio, monoleato di sorbitano, citrato di ammonio, cetrimide, cloruro di litio, tellurite di potassio, verde malachite, tra gli altri.

A volte i media possono essere sia selettivi che differenziali. Allo stesso modo, il grado di selettività varia da un mezzo all'altro..

Alcuni sono altamente selettivi, caratterizzati da condizioni di estrema ostilità per la maggior parte dei microrganismi e dove solo un piccolo numero di specie è in grado di resistere alle condizioni presenti nell'ambiente e quindi di crescere in modo soddisfacente. Ad esempio, TCBS agar e MRS agar, tra gli altri.

Mentre altri sono moderatamente selettivi, cioè quelli che inibiscono un gruppo specifico di microrganismi, come i batteri Gram positivi. D'altra parte, favoriscono la crescita di una grande varietà di batteri Gram negativi; ad esempio, Mac Conkey agar.

Esistono infine terreni di coltura a basso potere selettivo, ovvero quelli che consentono la crescita di un'ampia varietà di batteri Gram positivi e Gram negativi, nonché di alcuni lieviti, inibendo solo un piccolo gruppo di microrganismi. Esempio: agar EMB.

Terreni di coltura solidi selettivi

Agar Baird-Parker

Terreno progettato per la rilevazione di stafilococchi coagulasi positivi (Staphylococcus aureus). Contiene come sostanze inibitrici cloruro di litio e tellurito di potassio.

BCYE Agar o Yeast Charcoal Extract Buffered Agar

È un terreno di coltura altamente arricchito, soprattutto per l'isolamento delle specie Legionella e Nocardia. Questo terreno diventa selettivo con l'aggiunta di antimicrobici come la polimixina B, la vancomicina e l'anisomicina..

Agar BHI con antibiotici

L'agar BHI è originariamente un terreno arricchito, ma se vengono aggiunti cloramfenicolo e cicloesimide, è ideale per l'isolamento selettivo di funghi di interesse clinico..

BIGGY agar o Nickerson agar

Terreno selettivo e differenziale per l'isolamento delle specie Candida. Contiene citrato di ammonio, bismuto e solfito di sodio, che agiscono come inibitori della crescita batterica.

Bordet Gengou Agar

Terreno di coltura arricchito e selettivo, specialmente per l'isolamento di Bordetella pertussis Y Bordetella parapertussis. Contiene cefalexina per inibire la flora associata.

Campy agar con sangue

Terreno utilizzato per l'isolamento del genere Campylobacter. Contiene cefoperazone, vancomicina e amfotericina B per inibire la crescita di batteri e funghi Gram negativi e Gram positivi.

Campylobacter Butzler Agar

Terreno speciale per l'isolamento di specie del genere Campylobacter. È integrato con sangue di cavallo, tra gli altri nutrienti. Contiene anche varie sostanze inibitorie, come novobiocina, colistina, cefazolina, bacitracina e cicloesimide..

Campylobacter Skirrow Agar

Terreno selettivo per l'isolamento delle specie Campylobacter. Contiene sangue di cavallo e altri nutrienti. Come sostanze inibitorie contiene vancomicina, polimixina B e trimetoprim.

Agar CCF o agar fruttosio, cicloserina, cefoxitina

Come indica il nome, contiene cicloserina e cefoxitina come sostanze inibitorie e viene utilizzato per l'isolamento di Clostridium diffcile in campioni di feci, tra gli altri campioni intestinali.

Agar cetrimide

Terreno selettivo, progettato per l'isolamento di Pseudomonas aeruginosa, favorendo la produzione di pigmenti. La cetrimide (bromuro di cetil trimetilammonio) è la sostanza che inibisce la crescita di batteri diversi da P. aeruginosa.

Agar cioccolato con isovitalex e vancomicina

Questo mezzo è originariamente molto arricchito. L'aggiunta di vancomicina è utile per l'isolamento selettivo di ceppi di Neisseria gonorrhoeae Y N. meningitidis.

Agar CIN o agar cefsulodina, irgasan, novobiocina

È un terreno di coltura moderatamente selettivo per l'isolamento delle specie Yersinia.

Agar CNA (colistina, acido nalidixico)

È uno speciale terreno selettivo per l'isolamento di batteri Gram positivi come Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus e lieviti, ma inibisce lo sviluppo di batteri Gram negativi come Pseudomonas e specie della famiglia Enterobacteriaceae..

Agar Czapek 

Terreno progettato per la coltura di batteri e funghi saprofiti. Questo terreno contiene azoto inorganico. Per questo motivo, questo terreno è considerato selettivo, poiché possono crescere solo microrganismi in grado di utilizzare composti inorganici come unica fonte di azoto..

Agar EMB

Terreno leggermente selettivo e differenziale, utilizzato per l'isolamento di Enterobacteriaceae. Escherichia coli è particolarmente rilevato su questo terreno dal colore nero verdastro brillante delle sue colonie. Il grado di selettività che possiede è dovuto alla presenza di coloranti all'anilina (eosina e blu di metilene).

Endo agar

Terreno minimamente selettivo e differenziale, utilizzato per l'isolamento e la differenziazione dei bacilli Gram negativi fermentanti e non fermentanti il ​​lattosio appartenenti alla famiglia delle Enterobacteriaceae e ad altre famiglie.

Il solfito di sodio e la fucsina basica inibiscono la maggior parte dei batteri Gram positivi. Escherichia coli su questo terreno produce caratteristiche colonie rosso scuro con una lucentezza metallica verdastra iridescente.

Agar Hektoen

Terreno selettivo e differenziale per l'isolamento di batteri enteropatogeni dei generi Shigella e Salmonella. Come sostanza inibitoria, contiene sali biliari, sopprimendo lo sviluppo di batteri Gram positivi e alcuni Gram negativi..

Agar Löwenstein-Jensen

Terreno appositamente progettato per l'isolamento e lo sviluppo di batteri del genere Mycobacterium, in particolare le specie di tubercolosi, tra gli altri.

Il terreno contiene verde malachite; Questa sostanza inibisce la flora Gram positiva e Gram negativa che è stata in grado di resistere alla precedente disinfezione del campione. Contiene anche glicerina che stimola la crescita di M. tuberculosis, ma inibisce lo sviluppo di M. bovis e altri microrganismi.

Mac Conkey Agar

È un terreno selettivo e differenziale. Viene utilizzato per l'isolamento di bastoncini Gram negativi non esigenti, fermentanti e non fermentanti al lattosio.

Il suo carattere selettivo è fornito dalla presenza di sali biliari e violetto cristallino. Queste sostanze inibiscono la crescita dei batteri Gram positivi e di alcuni fastidiosi bastoncini Gram negativi..

Agar salato al mannitolo

Agar selettivo e differenziale per l'isolamento di Staphylococcus aureus. Questo terreno ha un'alta concentrazione di cloruro di sodio che inibisce la crescita della maggior parte dei batteri..

SS agar

Terreno moderatamente selettivo e differenziale per l'isolamento dei generi Salmonella e Shigella. Il terreno contiene sostanze inibitorie, come sali biliari, citrato di sodio e verde brillante. Queste sostanze sopprimono la crescita di batteri Gram positivi, alcuni batteri Gram negativi e alcuni coliformi..

Regan Lowe Agar

Agar selettivo per l'isolamento di Bordetella pertussis. Il terreno contiene carbone, cefalexina e amfotericina B come sostanze inibitorie..

Agar SABHI

Terreno selettivo per l'isolamento di funghi patogeni, come i dermatofiti, Blastomyces dermatitidis e Histoplasma capsulatum. Contiene cloramfenicolo.

Agar sangue di cavallo con bacitracina

Terreno speciale per l'isolamento di Haemophilus influenzae. La bacitracina inibisce la flora associata.

Agar carbone sangue di cavallo

Terreno selettivo utile per il recupero di ceppi di Bordetella pertussis Y B. parapertussis da campioni clinici. Contiene cefalexina per inibire la flora associata.

Agar sangue kanamicina-vancomicina (KV)

Terreno selettivo, speciale per l'isolamento di batteri anaerobici, come Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium e Veillonella.

Bismuth Sulfite Agar

Terreno selettivo per l'isolamento di Salmonella enterica, sottogruppo enterica, sierotipo Typhi. Questo terreno contiene solfito di bismuto di colore verde brillante per inibire la crescita di microrganismi Gram positivi e alcuni batteri Gram negativi..

Agar TCBS (tiosolfato, citrato, sali biliari)

Terreno altamente selettivo per l'isolamento di specie del genere Vibrio. Contiene citrato di sodio, bile di bue e un pH alcalino che inibisce la flora associata.

Agar Thayer-Martin

Terreno altamente nutriente e selettivo per l'isolamento di Neisseria meningitidis e Neisseria gonorrhoeae. La flora di accompagnamento è inibita dalla presenza di vancomicina, colistina e nistatina.

Agar verde brillante

Terreno selettivo per l'isolamento di ceppi del genere Salmonella. Come suggerisce il nome, contiene verde brillante come sostanza inibitrice. Ciò impedisce la crescita di batteri Gram positivi e un gran numero di microrganismi Gram negativi..

Agar Vogel-Johnson

È un terreno di coltura selettivo e differenziale, formulato per l'isolamento di Staphylococcus aureus e inibisce la crescita dei batteri Gram negativi e anche di alcuni Gram positivi. Le sostanze inibitorie sono il tellurito di potassio, il cloruro di litio e la glicina..

Agar XLD

È un terreno selettivo e differenziale per l'isolamento di enteropatogeni di Salmonella e Shigella. Il sodio desossicolato conferisce il carattere selettivo al terreno.

CHROMagar (Candida Medium)

È un terreno selettivo e differenziale per aiutare l'isolamento e l'identificazione delle specie di Candida. Il terreno contiene cloramfenicolo per inibire la crescita dei batteri.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson e Harris (EMJH)

Terreno selettivo per la coltivazione di Leptospiras. Contiene polisorbato 80, che inibisce la crescita della maggior parte dei batteri.

Terreni di coltura liquidi selettivi

Brodo BHI NaCL 6,5%

Brodo selettivo per il recupero di Enterococcus. L'elevata concentrazione di cloruro di sodio inibisce la crescita del microbiota associato.

Brodo CE

Brodo selettivo per il recupero dei coliformi totali e fecali. Contiene sali biliari che inibiscono la crescita di altri microrganismi.

Brodo GN

Brodo selettivo per il recupero di Salmonella e Shigella. Contiene citrato di sodio e desossicolato di sodio, che inibiscono i batteri Gram positivi e i coliformi.

Brodo Rappaport-Vassiliadis

È un terreno di arricchimento selettivo per le specie Salmonella. Contiene verde malachite come sostanza inibitoria.

Brodo di selenite

È un terreno di coltura selettivo, utile per l'arricchimento di campioni dove si sospetta la presenza di batteri enteropatogeni del genere Salmonella..

Come suggerisce il nome, contiene selenito di sodio come sostanza inibitoria, che sopprime la crescita dei batteri Gram positivi e della maggior parte dei batteri nel tratto gastrointestinale..

Brodo tetrationato

Brodo selettivo per l'arricchimento e il recupero di ceppi del genere Salmonella.

Il tetrationato formato dalla reazione generata tra il tiosolfato di sodio e la soluzione iodata presente nel terreno inibisce la crescita dei coliformi e favorisce lo sviluppo di batteri che contengono l'enzima tetrationato reduttasi (Salmonella).

Contiene anche sali biliari e alcune varietà includono il verde brillante; entrambe le sostanze inibiscono la maggior parte dei batteri Gram positivi e alcuni Gram negativi (coliformi).

Campy Thioglycollate Broth

Brodo speciale per promuovere lo sviluppo di C. jejuni subsp jejuni. Contiene amfotericina B, cefalotina, polimixina B, trimetoprim e vancomicina.

Brodo Todd-Hewitt con sangue e antibiotici

Serve per arricchire i campioni e promuovere lo sviluppo di Streptococcus agalactiae delle secrezioni vaginali. Come sostanze inibitorie contiene acido nalidixico e gentamicina o colistina..

Riferimenti

  1. Terreni di coltura microbiologici clinici (anno accademico 2012-2013). Disponibile su: asignatura.us.es
  2. BD Laboratories. Campylobacter Skirrow Agar e Campylobacter Butzler Agar. 2013, disponibile su: bd.com
  3. Laboratori IVD. Löwenstein-Jensen. Disponibile su: bio-rad.com
  4. Neogen Laboratories. Brodo GN (Hajna). Disponibile su: foodsafety.neogen.com
  5. BD Laboratories. CHROMagar. Candida Medium 2014, disponibile su: bd.com
  6. BD Laboratories. Brodo Rappaport Vassiliadis. 2003, disponibile su: bd.com
  7. Portale Web Lifeder.com. Disponibile su: Lifeder.com
  8. BD Laboratories. Leptospira Medium Base EMJH2011 Disponibile su: http://legacy.bd.com
  9. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosi microbiologica. 5a ed. Editoriale Panamericana S.A. Argentina.
  10. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Editoriale Panamericana S.A. Argentina.

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