Il Tecnica Faust È una metodologia che consente la concentrazione di alcune uova e / o larve di parassiti contenute nelle feci mediante flottazione. Viene utilizzato quando i test delle feci diretti sono negativi o quando si desidera ottenere campioni puliti privi di detriti.
I metodi di concentrazione per gli esami coproparassitologici sono di tre tipi: per flottazione, per sedimentazione o con metodi che combinano i due precedenti. Questi metodi aumentano le possibilità di risultati positivi.
Il metodo Faust consiste nel mescolare parte del campione di feci con una sostanza più densa delle uova o dei parassiti da concentrare. Questo fa sì che, essendo meno densi, galleggino in superficie. Il liquido surnatante viene raccolto e visualizzato al microscopio per l'identificazione e la quantificazione..
Questo metodo viene utilizzato per visualizzare le uova di elminti. A sua volta, ha dimostrato di essere un metodo molto sensibile per la diagnosi di Giardia lamblia, un protozoo flagellato ampiamente diffuso in tutto il mondo. I metodi di galleggiamento non sono raccomandati per uova di parassiti molto pesanti come tenie e trematodi..
I parassiti sono una delle infezioni intestinali più diffuse in tutto il mondo, soprattutto nei paesi poveri con scarse misure sanitarie. Per questo motivo, disporre di metodi sensibili che consentano l'identificazione e la quantificazione di questi parassiti è molto utile per la diagnosi e il trattamento..
Indice articolo
La tecnica si basa sull'esistenza dei diversi pesi specifici di uova, parassiti, cisti, larve e detriti, utilizzando soluzioni di solfato di zinco come metodo di flottazione..
La logica alla base della tecnica è mescolare il campione con una soluzione di solfato di zinco che abbia una densità maggiore rispetto a uova, larve o parassiti più leggeri..
Ciò consente agli elementi più pesanti di precipitare e di galleggiare quelli più leggeri che compaiono nel surnatante dopo la centrifugazione dei campioni..
- Preparare una soluzione di solfato di zinco con una densità di 1,18 o 1,2 g / ml se il campione è stato precedentemente trattato.
- Preparare un rack con provette precedentemente etichettate.
- Avere una macchina centrifuga.
- Tenere a portata di mano vetrini per microscopio e vetrini coprioggetto. Tutti devono essere etichettati
- Garantire la disponibilità di una soluzione Lugol per macchiare le lastre.
- Avere una garza per filtrare.
- Avere imbuti e acqua distillata.
- Individua contenitori di plastica o cartone etichettati.
- Inoltre applicatori e manico sterile di 5 mm.
- Un accendino per sterilizzare il manico.
Per qualsiasi esame delle feci, l'esame inizia con quello che viene chiamato "esame macroscopico" dei campioni..
Vengono descritti la consistenza, il colore, la presenza di quello che sembra essere sangue, la presenza di muco e la presenza di parassiti adulti..
Quindi si procede all '"esame microscopico" delle feci, questo dipende dal metodo. Il più semplice è il metodo dello striscio diretto, che è il metodo di osservazione microscopico più semplice per i parassiti..
La procedura prevede il posizionamento di una piccola quantità di campione direttamente su un vetrino. Mettere diverse gocce di soluzione salina che dovrebbero essere di dimensioni simili al campione. Mescolare la soluzione salina con le feci fino a formare una miscela omogenea. Posizionare un vetrino ed esaminare al microscopio.
La seconda procedura consiste nel metodo di galleggiamento Faust, la cui versione originale consiste in:
1- Mettere circa due grammi di feci in un contenitore adatto a questo scopo.
2- Aggiungere 30 ml di soluzione flottante di solfato di zinco con la quale si prepara un'emulsione mescolando la soluzione con le feci.
3- Filtrare con un colino metallico in un secondo contenitore e trasferire in una provetta.
4- Aggiungere altra soluzione di galleggiamento fino a formare un menisco nel tubo.
5- Posizionare un vetrino coprioggetto sul menisco. Lascia riposare per 10-15 minuti.
6- Rimuovere il vetrino coprioggetto e posizionarlo su un vetrino, che verrà esaminato al microscopio.
In origine il metodo non utilizzava la centrifugazione, tuttavia è ora incluso in quanto si ottengono risultati migliori. La tecnica prevede una serie di passaggi per ottenere una procedura corretta, questi sono i seguenti:
1- Le feci vengono lavate con acqua, mescolate bene e poi filtrate con una garza piegata in quattro. Il campione viene posto in una provetta.
2- Centrifugare e rimuovere il surnatante (campioni tenuti sopra l'acqua). I passaggi 1 e 2 vengono ripetuti fino a quando il surnatante è "chiaro".
3- Il solfato di zinco viene aggiunto al campione filtrato e centrifugato.
4- Si mescola bene.
5- Centrifugare nuovamente per 1 minuto a 2500 rpm (giri al minuto).
6- Si recupera il surnatante con un'ansa sterile di circa 5 mm; le provette non devono essere agitate.
7- Il campione recuperato dal surnatante viene posto su un vetrino e una goccia di Lugol può essere colorata, il vetrino viene posizionato e osservato al microscopio.
8- I contenitori e le provette sono etichettati.
- Gli elementi utilizzati per la diagnosi possono essere osservati puliti e privi di “detriti”, questo facilita l'osservazione del foglio e riduce il tempo impiegato per la diagnosi..
- Nel surnatante vengono recuperate sia le larve che le uova e / o le cisti.
- È un metodo a basso costo.
- La procedura è molto semplice e di facile implementazione.
- La diagnosi è rapida e precisa.
- Data l'importanza e l'alta incidenza della parassitosi nei paesi poveri, questi metodi economici e di facile utilizzo sono ideali per la diagnosi e il monitoraggio di queste patologie..
La densità della soluzione di galleggiamento produce una contrazione delle larve, cioè si restringono e, in un periodo molto breve, possono deformarsi. Ciò costringe l'esaminatore a fare immediatamente la diagnosi e i campioni trattati non possono essere conservati per esami futuri..
Come con tutti i metodi di identificazione microscopica, è necessario uno staff di esaminatori di grande esperienza per effettuare diagnosi accurate..
La rapida deformazione degli elementi necessari alla diagnosi, pur costituendo un evidente svantaggio, può essere corretta effettuando immediate osservazioni microscopiche.
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