Il mezzo Cary Blair è un agar semisolido, utilizzato per il trasporto e la conservazione di campioni biologici che ospitano patogeni intestinali, microrganismi labili e anaerobici. Come ogni mezzo di trasporto, la sua funzione è quella di mantenere il campione in condizioni ottimali fino alla sua coltivazione. I microrganismi patogeni presenti, così come il microbiota di accompagnamento, devono rimanere vitali, ma senza aumentare la loro popolazione..
Cary Blair Medium è il risultato del cambio di formulazione di Stuart Transport Medium. La modifica è stata effettuata nel 1964 e consisteva nella sostituzione del sistema di regolazione del pH (glicerofosfato) con un tampone fosfato inorganico..
La riformulazione è stata necessaria perché i suoi creatori si sono resi conto che il glicerofosfato dopo un certo tempo poteva essere metabolizzato da alcuni batteri saprofiti. Questi si sovrappongono moltiplicando gli agenti patogeni presenti.
Altre modifiche sono state l'eliminazione del blu di metilene, nonché un riaggiustamento del pH verso l'alcalinità (pH 8,4). Tutti questi cambiamenti hanno migliorato l'efficienza dei mezzi di trasporto.
In origine il terreno Cary Blair veniva utilizzato per il mantenimento di agenti patogeni intestinali, come Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.
Tuttavia, in seguito è stata osservata l'efficacia nel preservare la vitalità di microrganismi patogeni esigenti e labili, come ad esempio: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae e alcuni anaerobi.
Indice articolo
Cary Blair Medium contiene cloruro di sodio, tioglicolato di sodio, fosfato disodico, cloruro di calcio e agar.
Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico del terreno, il fosfato disodico e il cloruro di calcio bilanciano il pH. Da parte sua, il tioglicolato di sodio mantiene un basso potenziale di riduzione dell'ossidazione, mentre la piccola porzione di agar fornisce la consistenza semisolida..
Il terreno Cary Blair non contiene sostanze nutritive, poiché la funzione di un mezzo di trasporto è quella di mantenere il campione senza che questo subisca variazioni in termini di umidità e carica microbica; cioè evita la disidratazione del campione preservando la vitalità e la quantità dei microrganismi presenti.
Infine, il pH leggermente alcalino impedisce la morte dei microrganismi per acidità, in particolare i Vibrio sono molto sensibili agli acidi.
Il supporto Cary Blair è disponibile in commercio come dispositivo speciale pronto per l'uso. Il sistema di trasporto è coperto da una busta di plastica Peel Pack. Al suo interno contiene un tampone per la raccolta del campione e il tubo contenitore per il terreno semisolido di Cary Blair..
Inoltre nel mercato ci sono case commerciali che forniscono il mezzo disidratato per la sua preparazione in laboratorio..
Per fare questo, pesare 13,2 g del mezzo disidratato e scioglierlo in un litro di acqua distillata. Riscaldare e agitare la preparazione fino a completa dissoluzione. Distribuire il terreno in provette con tappo a vite (bachelite).
Cuocere a vapore le provette per 15 minuti. Lasciate raffreddare e mantenete a temperatura ambiente fino al momento dell'uso.
Il terreno Cary Blair non inoculato può essere conservato in modo ottimale per un massimo di 18 mesi a temperatura ambiente.
Il pH del mezzo deve essere regolato a 8,4 ± 0,2. Il colore del terreno preparato è beige, con qualche opalescenza.
Cary Blair Medium viene utilizzato quando i campioni di feci, tamponi rettali e tamponi vaginali non possono essere processati immediatamente.
Quando non sono disponibili mezzi di trasporto, i campioni possono essere conservati a -70 ° C.
Il tampone viene impregnato con il campione e viene introdotto nel terreno Cary Blair, senza raggiungere il fondo.
Il terreno Cary Blair deve avere un'etichetta in cui sono inseriti i dati di base, come: nome e cognome del paziente, numero di identificazione del campione, fonte della raccolta del campione, medico curante, data e ora della raccolta. , diagnosi presuntiva, trattamento antibiotico.
Coperto ermeticamente e trasportato a temperatura ambiente per campioni fecali. Considerando che, per i campioni vaginali alla ricerca di microrganismi anaerobi, si consiglia di trasportare i campioni a 4 ° C.
In tutti i casi, il tempo di trasferimento consigliato è di 4-6 ore, con un massimo di 24 ore..
Se la presenza di Campylobacter jejuni nei campioni di feci e questi non possono essere processati entro 24 ore, si consiglia la conservazione in terreno Cary Blair a 4 ° C.
Diversi studi hanno dimostrato che il terreno Cary Blair può rimanere vitale per i microrganismi enteropatogeni del genere Shigella e Salmonella fino a 49 giorni dopo il prelievo del campione..
Da parte sua, Vibrio cholerae, un altro importante patogeno intestinale, è in grado di sopravvivere per 22 giorni, mentre Yersinia pestis (agente eziologico della peste bubbonica e polmonare) può essere guarito dopo 75 giorni.
Tuttavia, nonostante la durata dimostrata in termini di recupero di questi microrganismi, si raccomanda di trasportare i campioni prelevati nel terreno Cary Blair al laboratorio il più rapidamente possibile..
Allo stesso modo, una volta che il campione raggiunge il laboratorio, deve essere seminato senza indugio nei rispettivi terreni di coltura..
D'altra parte, il terreno Cary Blair, oltre ad essere utile per il trasporto di microrganismi facoltativi, è consigliato anche per campioni contenenti patogeni anaerobici..
In questo senso, DeMarco e collaboratori nel 2017 hanno realizzato uno studio dal titolo: Sopravvivenza dei microrganismi vaginali in tre sistemi di trasporto disponibili in commercio.
Hanno dimostrato che il terreno di trasporto Cary Blair è il miglior mezzo di trasporto per la conservazione e il recupero dei microrganismi anaerobi vaginali. Allo stesso modo, hanno dimostrato che la velocità di recupero più elevata è stata raggiunta quando la temperatura di trasferimento era di 4 ° C..
Pertanto, si conclude che la temperatura di trasporto per i tamponi vaginali (microrganismi anaerobici) dovrebbe essere di 4 ° C. Mentre per i campioni fecali alla ricerca di microrganismi facoltativi, la temperatura ideale è la temperatura ambiente..
Ceppi noti come Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.
Il terreno viene inoculato con il ceppo scelto e mantenuto a temperatura ambiente per 24 ore. Vengono quindi seminati nei corrispondenti terreni di coltura. In tutti i casi, è previsto un soddisfacente recupero del microrganismo in questione..
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